PLC在QC实验室控制系统中主要用来检测原辅料、中间体（半成品）、产品的含量和（或者）杂质。现在已经非常普及了，在FDA的cGMP认证或者审计中，是“中枪”频率非常高的仪器之一。结合自己的经验，和朋友们分享下如何使HPLC系统顺利通过FDA的检查，不出现或者仅出现一般的缺陷项。
HPLC系统经常被检查到的缺陷主要是：
1、HPLC确认没有年度确认计划中没有体现或者没有做确认或者做的项目不全、不合适。
2、HPLC的没有纳入公司的仪器台账中。
3、HPLC的使用、维护没有SOP或者没有使用、维护记录，或者记录填写不合适。
3、HPLC系统色谱数据处理软件的安全性存在问题。
4、没有色谱柱的使用记录。
5、检测时没有做系统适用性试验或者做了但是方法不合适。
6、液相用标准品（对照品）或者工作标准品的管理和使用存在缺陷。
下面逐条进行分析并采取应对措施：
1、对于新购买的液相色谱仪，应该有URS（可以和厂家共同完成）；到货后应该进行3Q确认（IQ\OQ\PQ)，如果实际工作中采用的方法和厂家的方法不同，也可以只做IQ和OQ，等制定好检验SOP后再做PQ。FDA检查员对中国计量官方的检定是不认可的，所以HPLC的3Q确认是必须做和到期后做再确认的。一般HPLC3Q确认周期为一年，而HPLC强制检定周期为2年。
2、不管是新的或者是已有的HPLC，必须纳入公司的QC仪器设备管理中。
3、在QC的仪器设备年度确认计划中必须有每台HPLC的确认计划和确认方案。HPLC的确认方案应该制定的详细合理。这里确认和检定是完全不同的两个概念，不能混淆，更不能互相代替。FDA的审计人员是指认可HPLC确认的。
4、HPLC应该有使用SOP、维护SOP，并有相应的使用记录、维护记录。我们做的差的是没有维护SOP和记录，或者有但是执行和记录不合适。举个例子，如果你的HPLC的某一部件进行了更换，应该记录更换的详细操作过程，而不是只填写“已更换"。如果更换了关键部件，还要做变更管理，甚至做HPLC的确认。至于哪些是关键部件，是按照风险评估出来的。
5、HPLC的权限管理：使用的计算机应该设有开机密码的，屏幕保护也建议设密码。国产HPLC使用的色谱软件有使用权限管理的非常少，所以无法设定化验员和QC主管的权限，这样HPLC的参数设置和图谱就存在被误删或者更改的风险。国外的知名品牌的HPLC在这方面做得比较好。
6、审计追踪功能：FDA的cGMP要求色谱软件具有审计追踪功能，并且在检测时使用，这样可以防止通过修改计算机的时间等方式造假。国产的HPLC的色谱软件没有审计追踪功能，这本身就是缺陷，为造假提供了可能。尤其是在做分析方法验证和HPLC的3Q确认时，国产的HPLC的色谱图的保留时间和峰面积的重现性不好，有的图谱和数据是不能使用的。
7、积分参数：对于一个分析方法，积分参数应该是分析方法的一部分，写在方法中。如规定峰宽是多少，斜率是多少，最小峰面积是多少。一但确定下来，就不能再改动了，因为再改动的话，对定性和定量会有影响，得到的峰的个数和面积或者最终的含量结果会改变的。并且对你的结果的趋势分析和产品质量回顾和实际生产操作和产品质量造成人为地误导。
8、结果计算：有的色谱软件可以进行计算，或者用EXCEL进行计算，但是有时候或者计算机人工计算所得结果不同，甚至会造成OOS、OOT。原因就是每个数据的有效位数可能不同、在计算过程和最终结果确定造成了不一致。FDA检查员会按照计算计算公式用计算器进行计算的，这点应该引起重视。
9、系统适用性：这是在检测开始时必须要做的，只有系统适用性试验通过了，才能证明你的HPLC可以投入检测，否则，就要对流动相等进行适当的调整，重新做系统适用性试验。如果系统适用性试验不合格，还应该查找HPLC的硬件是否出现了故障。
10、色谱柱的使用记录，每次都要做，因为色谱柱是分离的核心，是HPLC最重要的部分。
11、对照品溶液和供试品溶液的制备：通常是都对照品、供试品分别称量2份，每份进2针，计算结果。
12、使用的标准品（对照品）、工作标准品，都要有使用记录，做到账物相符。
13、HPLC检测相关记录：如流动相的制备记录和批号，所用试剂的台账、分析天平的的校准、使用记录等，相关记录都要齐全。
14、附件
如何查HPLC克隆图、查修改系统时间等造假行为
找色谱造假漏洞的思路是：明修栈道暗度陈仓。造假修改之处一般比较完美，不容易发现，但是记录的相关性往往考虑不周全，从这方面入手，旁敲侧击，间接证明造假。比如，检查连续打印图谱的纸张质地、油墨深度，能推测出某一张图谱不是一个时间做出来的。再比如，稳定性试验有关物质的风面积越来越小，你敢说你不是造假。再再比如，天平使用活页记录，十有八九是为了造假方便。再再再比如，我拿一套图，让操作人员在电脑中点开，如果你是从好几个文件夹中点开的，那么你造假不够熟练。再再再比如，看见草稿纸我就认为你造假。
1）.对人工牛黄成品及原辅料检验所用的紫外-可见分光光度计工作站进行核查，发现其工作站的系统时间有反复修改的痕迹。（白云山东泰商丘药业有限公司）
点评：查造假的最简单的技术方法是“查排序”，进样时间很难安排的很perfect。根据出峰时间和进样时间可以很轻松的查出造假。Soeasy！
2）.在岛津LC-10AT的实验日志中发现修改检验日期的痕迹。①年10月11日后，出现年9月29日的地巴唑（批号：-3、-1、-8、-9、-10）稳定性考察有关物质项的检测记录。②年12月17日后，出现年4月16日的食母生片精密度、耐用性等项目的检测记录。（上海青平药业有限公司）
点评：检查天平的使用日志、标准品领用记录等可能会有惊喜，因为色谱造假技术难度大且成本高。
3）.岛津LC-20AT存在图谱删除现象，且未说明原因，包括：①地巴唑（批号：-1）有关物质检查项目下编号为15、16图谱被删除。②以盐酸普罗帕酮为标记物的固体制剂生产设备清洁验证中，年6月16日的系统适用性试验有四张图谱被删除。（上海青平药业有限公司）
4）.检验记录不真实。①涉嫌套用图谱和检验数据，如不同批次蔗糖（批号分别为：、、）红外光谱图谱一致；不同批次地巴唑原料（批号分别为、）检验数据完全一致。②涉嫌编造检验数据，如批号为的地巴唑样品检验报告书有3个电子版，如.doc、甲1.doc、甲.doc），报告内容除成品数量不同外，其它数据完全一致。（大同市云岗制药有限公司）
点评：判断“克隆图”的方法是看色谱峰的参数，峰面积、风高等参数小数点后七八位都一样，那么恭喜你，中奖了，这就是克隆图。
5）.部分检验记录无复核人签字，抽查野菊花（批号）药材检验记录，未见高效液相纸质图谱，经查询电子图谱，发现检验人员选择性地采用实验数据，未如实记录。抽查蔗糖（批号）检验记录，无检验用标准硫酸钾溶液、草酸铵试液、标准钙溶液等试液的配制记录，现场也未见上述溶液及配制溶液所用试剂的实物。（广西忠宁制药有限公司）
6）.灵芝孢子粉胶囊（批号：）批检验记录报告日期为年4月18日，相应的原始记录检验日期多处修改。（芜湖博英药业科技股份有限公司）
7）.涉嫌编造检验记录。①批号为和柴胡饮片含量检验数据完全一致；黄芪、黄芩、刺五加药材与饮片检验数据完全一致；②企业生产的刺五加、黄芪、黄芩、柴胡等中药饮片检验记录中没有相应的中药材和中药饮片检验图谱；③在企业化验室未见有生产中药饮片的对照品、对照药材，现场看到的黄芩苷对照品溶液、柴胡皂苷a、d混合液未标示配制日期。（黑龙江鹤祥春中药饮片有限公司）
8）.生产记录、检验记录和物料记录等涉嫌造假。在穿心莲饮片“预处理工序记录”和“提取、浓缩工序生产记录”中，操作人员覃某的签名字样出现3种完全不同的笔迹，造假痕迹明显。该企业不具备乳香、太子参、穿心莲三种药材全检条件，但企业检验报告书均显示进行了全检。乳香未购入做鉴别所需的对照品，也不具备含量测定所需的气象色谱仪；太子参现场未见检验用对照品，也无对照品的购入、使用记录，其含量测定图谱存在一图多用的现象；穿心莲现场未见检验用对照品，也无对照品的发放记录，其含量测定图谱同样存在一图多用的现象。该企业化验室主任周某于年2月26日入职，但乳香0210批次的《原药材检验报告书》的复核人为周某，签发日期为年2月13日，时间上明显不符。（贵州寿仙药业有限公司）
9）.在数据管理方面存在缺陷。如SPX-B-2型生化培养箱性能再确认中的温度检测电子数据未进行备份：高效液相色谱仪、原子吸收仪工作站虽设定密码，但密码在仪器操作人员中共同使用，无法防止电子数据被修改或删除；SZA型热风循环干燥机再验证报告[PQP-(-)]所附原始记录中，悬浮粒子测定数据非原始打印数据（为手工抄写），细菌内毒素原始测定数据未归入报告中。（哈尔滨圣泰生物制药有限公司）
10）.该企业用于检验的高效液相色谱仪和紫外可见分光光度计未设置使用权限，计算机系统和仪器工作站同时均反映计算机系统时间日期有改动现象；电子实验数据也未进行备份。（辽宁玉皇药业有限公司）
点评：不同工作站有不同的备份方式，有的有一键备份功能。
11）.经检查组对企业电脑进行数据恢复，进一步检查发现该企业分别于年和年生产促肝细胞生长素溶液7批和16批，但企业无法提供相应的批生产、批检验等原始记录，生产过程无法追溯。（哈高科白天鹅药业集团有限公司）
12）.两台高效液相色谱仪（HPLC）未安装审计追踪功能，未设置登录用户及权限，计算机操作系统时间有修改痕迹。①编造HPLC的电子数据。检查发现实验室的两台HPLC中存有批号为、、、、等5批促肝细胞生长素提取物溶液图谱。②篡改紫外分光光度计（UV）的电子数据。将批促肝细胞生长素提取物溶液的UV数据修改后，用于批。（哈高科白天鹅药业集团有限公司）
点评：国产HPLC工作站的出样时间是采集系统时间，进样时间不是采集系统时间。国产工作站没有审计追踪功能，但是有系统日志。系统日志能记录哪天进了哪个样品，修改系统时间进样是能被发现的，但是系统日志是可以删掉的。
13）.质量控制方面存在问题。该企业高效液相色谱、气相色谱未设置分级操作权限账户，检验数据的安全性难以保证；批号为364的甘露醇未按质量标准对有关物质项进行检测。（陕西医药控股集团生物制品有限公司）
14）.原药材检验记录不真实。该企业年至年共购进黄芩原药材7批，调取该7批检验原始记录，发现其中两批黄芩原药材（Y--、Y--）的图谱与另外两批黄芩药材（0413、Y--）图谱高度一致，涉嫌修改时间和套用图谱。（石药集团河北永丰药业有限公司）
15）.修改数据。①ThermoHPLC（型号：ultimate-，编号A-04-07-21）数据库显示，批次盐酸氟哌噻吨原料药的杂质A进行了多次测定，其中年6月27-28日（工作站显示的进样时间）测定的样品检测结果合格，HPLC图谱被该批次检验记录采用，但检验记录中打印的图谱显示，对照溶液、供试品溶液和溶剂的测定时间均为年6月26日13：59。②ThermoHPLC（型号：ultimate-，编号A-04-07-21）工作站的电脑存在更改系统时间问题。例如，（1）系统时间从年7月17日更改为年7月6日，年7月6日对批次氟哌噻吨美利曲辛片含量均匀度进行测定；（2）系统时间从年7月13日更改为年6月21日，年6月21日对氟哌噻吨中间体进行测定；（3）系统时间从年7月12日更改为年6月27日。③“盐酸氟哌噻吨杂质A”序列显示，“氟哌噻吨混合对照”两次进样的时间分别为年6月27日的15：31和15：35，与每针30分钟的运行时间相矛盾。（海南益尔药业有限公司）
点评：有些色谱工作站禁止更改系统时间。那么魔高一尺道高一丈，先把工作站卸载了，再修改系统时间，再安装工作站。
16）.检验记录涉嫌造假，仪器使用日志不真实。在该企业液相工作站打印出的精制冠心片药粉液相色谱图，批号为0301、0501、0801、0802、0901样品液相色谱图高度一致，涉嫌一图多用的数据完整性问题。（吉林省辉南三和制药有限公司）
17）.奥拉西坦成品原始检验记录中采用红外光谱仪鉴别时，选择性的采用仪器内保存的工作对照品图谱比对作为检验结果进行判定；检验用高效液相色谱仪、气相色谱仪，多人共用登录密码，无权限受控，缺审计追踪等功能，不能确保图谱、数据的完整性。（湖南健朗药业有限责任公司）
点评：审计追踪有不同级别。最严格的审计追踪会监控电脑中所有文件的删除。
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